斯达特无柱磁珠分选方案：CD4⁺ T细胞纯度97.3%，CD8⁺ T细胞纯度93.6%
作者：斯达特高级产品经理 浏览次数：50
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斯达特无柱磁珠分选系统能够在20-30分钟内，从小鼠脾脏单细胞悬液中高效获得高纯度、未经抗体标记的“ untouched” CD4⁺和CD8⁺ T细胞。相比传统柱式分选，无柱设计避免了柱子堵塞、剪切力损伤及样本残留等问题，操作更简便，细胞活率更高。
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斯达特无柱磁珠分选方案：CD4⁺ T细胞纯度97.3%，CD8⁺ T细胞纯度93.6%
一、CD4⁺与CD8⁺ T细胞：免疫系统的"指挥官"与"执行者"
在免疫学研究与细胞治疗开发中，CD4⁺ T细胞和CD8⁺ T细胞占据着不可替代的核心地位。
CD4⁺ T细胞（辅助性T细胞） 是免疫应答的"指挥官"。它们通过识别抗原提呈细胞递呈的肽段，分泌多种细胞因子，调控B细胞产生抗体、激活CD8⁺ T细胞功能，并维持免疫记忆。在肿瘤免疫、自身免疫疾病、疫苗研发及移植耐受等研究领域，高纯度的CD4⁺ T细胞是解析免疫调控机制的关键工具。
CD8⁺ T细胞（细胞毒性T细胞） 则是免疫系统的"执行者"。它们能够直接识别并杀伤病毒感染细胞或肿瘤细胞，是细胞免疫治疗（如CAR-T、TCR-T）的核心效应细胞。获得高纯度、高活性的CD8⁺ T细胞，对于开展杀伤功能实验、单细胞测序及基因编辑研究至关重要。
为什么要分选CD4⁺和CD8⁺ T细胞？
在脾脏、外周血等复杂样本中，T细胞亚群与其他免疫细胞（如B细胞、NK细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞等）混杂共存。直接进行功能分析或培养，往往受到其他细胞的干扰，导致实验结果偏差。通过阴性分选（去除非目标细胞） 获得高纯度、未经抗体标记的"untouched"目标细胞，能够最大限度地保留细胞天然状态，确保下游实验结果的准确性和可重复性。
二、斯达特无柱磁珠分选方案：实验材料与操作流程
为满足科研工作者对高纯度、高效率、低操作的细胞分选需求，斯达特推出无柱磁珠分选系统，涵盖CD4⁺和CD8⁺ T细胞阴性分选试剂盒及配套磁力架。
实验材料
| 产品分类 | 产品编号 | 名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| CD4无柱阴选磁珠 | S0K3003 | Mouse CD4 T Cell Isolation Kit (Column-Free) | 100T |
| CD8无柱阴选磁珠 | S0K3004 | Mouse CD8 T Cell Isolation Kit (Column-Free) | 100T |
| CD4阴选试剂盒 | #19852 | EasySep™ Mouse CD4+ T Cell Isolation Kit | For processing 1 x 10^9 cells |
| CD8阴选试剂盒 | #19853 | EasySep™ Mouse CD8+ T Cell Isolation Kit | For processing 1 x 10^9 cells |
| 环形磁铁 | S0D3022 | Starter EasyIso Separator | 盒 |
| 分选Buffer | S0D3018 | Starter MagSep Separation Buffer | 250ml |
| 筛网 | abs7231 | 40um细胞筛网（300目，蓝色，底面过滤） | 50个/箱 |
| 红细胞裂解液（1×） | abs9101 | RBC Lysis Buffer | 100ml |
| 阻断FCR非特异性染色 | S0B0599 | Mouse FcR Blocking Reagent | 200T |
| 染色缓冲液 | abs9475 | Flow cytometry staining buffer | 500ml |
| 流式鉴定 | 130-118-329 | CD8a-FITC, mouse | 500T |
| 流式鉴定 | S0B5133 | PerCP-Cy5.5 Rat Anti-Mouse CD4 Antibody (GK1.5) | 50ug |
| 流式鉴定 | 561037 | APC-Cy™7 Rat Anti-Mouse CD45 | 100ug |
关键操作步骤（以CD4⁺ T细胞分选为例）
1.样本制备：取小鼠脾脏，置于40 μm无菌滤网上研磨，裂解红细胞，制备单细胞悬液并计数。
2.细胞重悬：用100 μL MagSep分离缓冲液重悬1×10⁷细胞。
3.抗体孵育：加入10 μL Biotin抗体Cocktail，室温孵育10 min。
4.磁珠结合：加入7.5 μL Streptavidin磁珠，室温孵育5 min（中途轻弹混匀一次）。
5.磁力分离：补加缓冲液至2.5 mL（5 mL流式管）或7.5 mL（15 mL离心管），置于磁力架上吸附3-5 min。
6.收集目标细胞：倾斜磁力架，将上清液转移至新管，即得纯化的CD4⁺ T细胞。
重要提示：0.1-1×10⁸细胞推荐使用5 mL单孔磁极；2-5×10⁸细胞推荐使用15 mL联排磁极。若样本活率偏低，建议配合去死细胞试剂盒（#S0K0009）使用。
三、测试结果：CD4⁺ T细胞纯度97.3%，CD8⁺ T细胞纯度93.6%
为验证斯达特无柱磁珠分选系统的实际性能，我们以C57小鼠脾脏为样本，分别使用斯达特CD4和CD8无柱阴选试剂盒进行分选，并通过流式细胞术检测分选后纯度。
CD4⁺ T细胞分选结果
未分选前：脾脏单细胞悬液中CD4⁺ T细胞比例约为20%-30%
斯达特CD4无柱磁珠分选后：CD4⁺ T细胞纯度达到 97.3%
流式图显示，非目标细胞（CD4阴性细胞）被高效去除，目标细胞群高度均一。
CD8⁺ T细胞分选结果
未分选前：脾脏单细胞悬液中CD8⁺ T细胞比例约为10%-20%
斯达特CD8无柱磁珠分选后：CD8⁺ T细胞纯度达到 93.6%
同样，流式结果清晰展示了优异的去除效率和高纯度富集效果。
结果解读
两组成果充分证明，斯达特无柱磁珠分选系统能够在20-30分钟内，从小鼠脾脏单细胞悬液中高效获得高纯度、未经抗体标记的"untouched" CD4⁺和CD8⁺ T细胞。相比传统柱式分选，无柱设计避免了柱子堵塞、剪切力损伤及样本残留等问题，操作更简便，细胞活率更高。
四、产品价值与推荐场景
斯达特无柱磁珠分选试剂盒的核心优势可概括为以下四点：
1. 高纯度，数据可靠
CD4⁺ T细胞纯度达97.3%，CD8⁺ T细胞纯度达93.6%，满足流式分析、单细胞测序、功能实验等对细胞纯度的严格要求。
2. 无柱操作，省时省力
无需分离柱、无需重力或注射器加压，仅需磁力架吸附3-5分钟即可完成分离，全程20-30分钟。
3. 细胞"untouched"，保留天然状态
阴性分选策略避免抗体直接标记目标细胞，最大限度地保留细胞膜表面受体的天然构象和功能活性，适用于后续培养、刺激或基因编辑。
4. 灵活适配，满足不同通量
提供5 mL单孔磁极（处理0.1-1×10⁸细胞）和15 mL联排磁极（处理2-5×10⁸细胞）两种规格，用户可根据样本量自由选择。
五、结语
无论是研究CD4⁺ T细胞的辅助调控机制，还是探索CD8⁺ T细胞的杀伤功能与细胞治疗应用，获得高纯度、高活性的目标细胞都是实验成功的第一步。斯达特无柱磁珠分选系统以97.3%（CD4）和93.6%（CD8） 的实测纯度、简便的无柱操作和灵活的样本处理能力，为免疫学研究者提供了一套高效、可靠的细胞纯化解决方案。
欢迎联系斯达特生物获取产品试用装或技术支持，让您的细胞分选实验更简单、更纯净、更高效。
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本文由斯达特技术专家团审核发布
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