产品中心细胞因子细胞因子套装

人 THP-1 细胞极化诱导试剂盒

Datasheet COA

价格￥2,600.00 （供应商现货： 3-5个工作日）

货号 UA090040

规格

SML

数量

产品介绍

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产品规格

物种

Human
溶解方法

IL-4/IL-13/IFN-γ Protein: Reconstitute at 0.1-1 mg/ml according to the size in ultrapure water after rapid centrifugation.

产品包含

货号	产品名称	反应种属/种属	表达系统	数量
UA040053	IFN-γ Protein, Human	Human	E.coli	1
UA040467	IL-13 Protein, Human	Human	E.coli	1
UA040026	IL-4 Protein, Human	Human	E.coli	1
UA080443	Lipopolysaccharide (LPS) solution (500X)			1

产品组分

包含	参考用量	S规格	M规格	L规格
IL-13 Protein, Human	20 ng/mL	10μg	50μg	100μg
IL-4 Protein, Human	20 ng/mL	10μg	50μg	100μg
IFN-γ Protein, Human	20 ng/mL	10μg	50μg	100μg
Lipopolysaccharide (LPS) solution (500X, 2.5mg/ml)	100 ng/mL	100μl	100μl	100μl*2

操作步骤

极化前准备：
用于诱导极化的细胞代数不宜过高，诱导极化前使用流式细胞术检测THP-1细胞的CD14和CD11b表达，两者不表达或低表达的THP-1细胞才可用于后续实验。
1. M1/M2诱导
1.M1诱导：
用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA。更换为M1诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL LPS、20 ng/mL IFN-γ），培养48h。
阴性对照：用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA。更换为完全培养基，培养48h。建议用Accutase收样送检。
2.M2诱导：
用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA，更换为完全培养基，静息24h。然后更换为M2诱导培养基（1640完全培养基，含20 ng/mL IL-4、20 ng/mL IL-13），培养24h。
阴性对照：用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA，更换为完全培养基，静息48h。建议用Accutase收样送检。

人 THP-1 细胞极化诱导试剂盒

物种

溶解方法