Receptor beads

推荐偶联流程（以抗体偶联为例）

1. 试剂配制

. 活化缓冲液：50 mM MES ，50 mM NaCl ，pH 6.0±0.05

. EDC 溶液：10 mg/ mL（活化缓冲液配制，现配现用）

. NHS 溶液：10 mg/mL（活化缓冲液配制，现配现用）

. 标记缓冲液：40 mM 硼酸缓冲液，pH 7.8±0.05

. 洗涤液：0.5% Triton X- 405 ，0.1% Tween- 20

. 封闭液：10% BSA ，7.5% 甘氨酸，pH 8.0

. 保存液：均相发光专用稀释液

2.微球活化

1）.取 0.1 mL 受体微球（1.0%），加 1 mL 活化缓冲液，超声混匀

2）15℃、20000 g 离心 15–20 min ，弃上清

3）重复洗涤 1 次，弃上清

4）加 1 mL 活化缓冲液重悬，加入 EDC 、NHS ，超声混匀

5）25℃ 、40 r/min 避光活化 15–20 min

6）离心弃上清，用活化缓冲液洗涤 2 次

3. 抗体偶联

. 用标记缓冲液将微球重悬

. 加入目标抗体，混匀

. 25℃、40 r/min 避光偶联 2 h

4. 封闭与保存

. 加入封闭液，25℃、40 r/min 避光封闭 2 h

. 用洗涤液离心洗涤 3–4 次

. 最后用均相发光稀释液重悬

. 2–8℃ 避光保存备用