产品中心 HICA均相化学发光 HICA Beads
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均相化学发光法（Homogeneous Immuno Chemiluminescence Assay, HICA）是基于供受体微球即Donor beads和Acceptor beads近距离传递能量发光的均相免疫分析方法。Donor beads识别蛋白1（Tag1标签），Accpetor beads识别蛋白2（Tag2标签），当蛋白1与蛋白2结合以后，beads的距离小于200nm。 Donor beads经激发光680nm激发后，体系内产生单线态氧并扩散至Acceptor beads， Acceptor beads经过氧化还原反应产生615nm发射光。信号强度与蛋白相互作用的强弱，成正比关系。
本品操作过程简便，无需洗涤，速度快、灵敏度高。可以检测弱结合。
储存条件
2～8℃ 避光储存；产品效期12个月。
【所需试剂】
名称
货号
Human IgG Donor Beads
UA086112
Streptavidin Acceptor Beads
UA086090
Universal Buffer 1
UA086113
【检测流程供参考】
检测流程
检测流程1 (37℃快速检测)
检测流程2 (室温检测)
第一步：
4μL hFC tag-M1 +4μL Biotin-M2+ 6μL Human IgG Donor Beads，避光/绿光
4μL hFC tag-M1 +4μL Biotin-M2+ 6μL Human IgG Donor Beads，避光/绿光
孵育
37℃ 震荡孵育20分钟，避光/绿光
室温孵育60分钟,，避光/绿光
第二步：
加入6μL Streptavidin Acceptor Beads，避光/绿光
加入6μL Streptavidin Acceptor Beads，避光/绿光
孵育
37℃震荡孵育10分钟，避光/绿光
室温孵育30分钟，避光/绿光
读数
仪器读数
仪器读数
【性能验证】
•样本配制：
使用Universal Buffer 1将生物素化的兔IgG (Bio-rIgG)预先稀释至15μg/mL（100nM）作为母液，然后按以下方案做梯度稀释：
编号
终浓度（nM）
通用缓冲液1
体积（μL）
高浓度添加
体积（μL）
C12
1.0E+01
210
90μL 母液
C11
3.0E+00
210
90μL C12
C10
1.0E+00
180
90μL C11
C9
3.0E-01
210
90μL C10
C8
1.0E-01
180
90μL C9
C7
3.0E-02
210
90μL C8
C6
1.0E-02
180
90μL C7
C5
3.0E-03
210
90μL C6
C4
1.0E-03
180
90μL C5
C3
3.0E-04
210
90μL C4
C2
1.0E-04
180
90μL C3
C1
0
180
/
•检测试剂配制：
名称
配制浓度
稀释液
Human IgG Donor Beads
25 μg/mL
Universal Buffer 1
Streptavidin Acceptor Beads
25 μg/mL
Universal Buffer 1
•37℃孵育模式结果：
最高信号：390419
最低信号：409
EC50= 0.076 nM
•室温孵育模式结果：
最高信号：194000
最低信号：181
EC50= 0.043 nM
1. 本实验对光敏感，操作中注意避光。建议在绿光环境（光照度低于100 LUX）下完成配制、加样及孵育步骤。
2. 本产品适配带有Alpha 检测模块的多功能酶标仪。
3. 使用前请涡旋充分混匀，也可通过短暂离心（2000×g，5–10秒），以便完全取用。
4. 建议使用本公司配套稀释液进行试剂配制及待测物稀释；如有特殊添加需求，可直接在该稀释液中加入相应成分。
5. 为保障不同批次实验数据的可比性，请务必严格控制孵育温度与时间。
6. 加样时请注意避免产生气泡。
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