UniOne^® TR-FRET Human Total IgG Kit (Assay Pro)

价格￥1,800.00 （供应商现货： 3-5个工作日）

货号 UA085005

规格

100T500T2500T10000T

数量

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背景介绍

本试剂盒采用均相时间分辨荧光技术，可用于检测细胞培养上清中Human IgG抗体。试剂盒中有一个抗体标记供体Eu（抗Human IgG-Eu）；另外一个是Human IgG标记受体（Human IgG-Ac）。抗Human的 IgG-Eu与Human IgG-Ac结合，320nm的光激发供体产生能量并转移至受体，使其受到激发，发射特定波长的光（665nm）。
样品中Human IgG抗体可以竞争结合抗Human IgG-Eu，信号与标准品中Human IgG的浓度成反比，从而可以根据标准曲线对样品中Human IgG进行定量。此均相实验无需洗涤可准确定量Human的总IgG的含量。

产品规格

产品组分

组分	浓度	100T	500T	2500T	10000T	储存温度
抗Human IgG-Eu*	50×	10μL	50μL	250μL	1000μL	-80℃
Human IgG-Ac *	50×	10μL	50μL	250μL	1000μL	-80℃
IgG标准品	1mg/ml	5μL	10μL	50μL	200μL	-80℃
检测缓冲液	1×	1.5mL	6ml	30mL	120mL	-80℃
标准品稀释液	1×	1.5mL	6ml	30mL	120mL	-80℃

注意：所有首次解冻后立即分装，并按建议储存温度保存，避免稀释后储存及反复冻融。

操作步骤

1、试剂准备

使用前将所有试剂室温融化（室温平衡至少30min）。384浅孔板反应体系为20μL（反应体系试剂用量如表2所示），在配制之前计算实验所需体积，按需配制；以下配制仅供参考，以500次为例。

表1. 试剂配制

试剂名称	配置	每个检测孔用量μL
抗Human IgG-Eu	50μL抗Human IgG-Eu中加入2450μL检测缓冲液，混匀备用。	5
Human IgG-Ac	50μLHuman IgG-Ac中加入2450μL检测缓冲液，混匀备用。	5
IgG标准品	取10μL的标准品储存液，加入115μL标准品稀释液，混合均匀，标曲稀释如下表。	10

表2.标准品工作液配制

2、加样及对照

样品的添加顺序：10μL标准品或样本；5μL 抗Human IgG-Eu；5μL Human IgG-Ac 依次加入 384 浅孔板中。（注意：Human IgG-Ac 最后添加）

NC：用5μL的检测缓冲液代替 5μL Human IgG-Ac，10μL标准品稀释液代替样品。

最大值对照对照：用10μL的标准品稀释液代替样品。

3、检测

用封板膜封住板孔，1000rpm 离心1min，室温孵育1h。在兼容TR-FRET的酶标仪上检测（激发光为320nm, 发射波长620nm和665nm）。

【结果计算】

1. TR-FRET Ratio计算

TR-FRET Ratio = 665nm / 620nm *10000

2. 计算CV（%）

CV（%）= Standard Deviation/Mean Ratio×100%

【数据示例】

请注意，以下数据不能代替实验中获得的数据，只作为示例，结果可能因TR-FRET兼容仪器而异。

注：推荐微孔板（384孔板，白色，浅孔）

UniOne® TR-FRET Human Total IgG Kit (Assay Pro)