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本试剂盒提供一个简单快速偶联方案,专门用于将辣根过氧化物酶(HRP)偶联到含有游离氨基的抗体、蛋白质,多肽或者其它配体上。与传统方法相比,我们的偶联反应具有更高的效率和产量,偶联物更为稳定,并不易脱落。试剂在pH7-9的缓冲液中与伯氨基(-NH2)有效反应,形成稳定的酰胺键。蛋白质,包括抗体,通常在赖氨酸(K)残基的侧链和每个多肽的N末端具有几种伯胺,这些伯胺可用作试剂标记的靶标。
功能与特点:
本试剂盒提供快速标记所需的全套试剂,且试剂易于保存。
100%的回收率,偶联过程2h, 动手时间约5min。
偶联产物不需纯化,且可长期保存。
分子别名
辣根过氧化物酶(HRP)快速偶联试剂盒
100μg可用于标记100µg抗体(单抗,多抗)或其他蛋白:
组份
装量
保存温度
备注
试剂 A
20µL
-20°C
抗体/蛋白稀释液
试剂 B
10µL
-20°C 避光保存
偶联剂
试剂 C
15µL
-20°C 避光保存
活化酶
500μg可用于标记500µg抗体(单抗,多抗)或其他蛋白:
组份
装量
保存温度
备注
试剂 A
50µL
-20°C
抗体/蛋白稀释液
试剂 B
30µL
-20°C 避光保存
偶联剂
试剂 C
60µL
-20°C 避光保存
活化酶
1mg可用于标记1mg抗体(单抗,多抗)或其他蛋白:
组份
装量
保存温度
备注
试剂 A
100µL
-20°C
抗体/蛋白稀释液
试剂 B
60µL
-20°C 避光保存
偶联剂
试剂 C
110µL
-20°C 避光保存
活化酶
1、本试剂对水份敏感,在开瓶前,需将各组分小瓶完全平衡至室温,以避免容器内的水份冷凝。
2、待偶联的抗体/蛋白缓冲液及浓度要求:抗体/蛋白应保存于10mM的磷酸盐缓冲液(1xPBS,pH 7.2-7.4)中,推荐的浓度范围为3-10mg/mL,缓冲液中不能含有氨基成分,避免与偶联剂发生竞争反应,影响偶联效果:具体包括伯胺(如Tris、甘氨酸、铵盐、EDTA),蛋白稳定剂(如BSA应<0.1%、明胶、甘油应<20%,), 及防腐剂,如叠氮钠等。若样品中含有可能干扰标记的物质,建议用PBS置换缓冲液,并浓缩至推荐浓度。
3、反复冻融对本试剂影响较大,任何未使用完的解冻试剂需丢弃,不可再次使用。
4、偶联产物的保存:若抗体/蛋白标记物的最终浓度小于0.5mg/mL,可考虑浓缩或添加稳定剂,存储于2-8°C,效期3个月。若需长期储存,偶联产物可冻干,或添加50%甘油后,储存于-20°C。







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