热搜词：
注册
登录
CN
  • CN
  • EN

产品中心 药物筛选试剂盒 抑制剂筛选

所有图片（1/2）

ActRIIA Enzyme Activity Inhibitor Screening Kit

ACVR2A,Activin receptor type IIA,ACTRIIA

价格 ￥8,940.00 （ 供应商现货 ： 3-5个工作日）
货号 UA080465
规格
数量
收藏 分享
产品介绍

产品介绍 评论(0)

背景介绍

  • Supercede 的领先项目 STX-001 是一种新型口服小分子 Activin 受体 II 型（ACTRII） 激酶抑制剂，正在临床前开发用于治疗肥胖症。在 II 期临床研究中，已经证明抑制 ACTRII 信号通路显著减少脂肪，同时刺激瘦体重（肌肉）的增加。对于肥胖症患者来说， 获得显著的脂肪减少并同时保持或增加瘦体重是一项关键需求，无论作为单药治疗还是与 促胰素（GLP-1）基础疗法相结合，ACTRII 抑制是临床上唯一证明能够实现这一有益整 体身体组成改变的机制。基于此，我们开发了 ActRIIA 和 ActRIIB 酶活抑制剂筛选试剂盒， 供研发使用。

    这个试剂盒包含我们自主表达的 ActRIIA蛋白，以及自主设计的适合底物， 结合 ADP激酶检测试剂盒，可以用于测试化合物对 ActRIIA酶活性的抑制效果

产品规格

  • 来源

    Human

  • 分子别名

    ACVR2A,Activin receptor type IIA,ACTRIIA
产品组分

  • 组分

    存储条件

    500 T

    1000 T

    ActRIIA (0.5 mg/mL)

    -60 °C

    1 vial, 25 μg

    1 vial, 50 μg

    Substrate (50μM),1000X

    -60 °C

    3μL

    6μL

    ATP( 10 mM)), 400x

    -20 °C

    250μL

    500μL

    ADP( 10 mM))

    -20 °C

    250μL

    500μL

    DTT (50 mM)1000X

    -20 °C

    5μL

    10μL

    1X Assay buffer

    2-8 °C

    5mL

    10mL

    ADP-Glo Reagent

    -20 °C

    2.5mL

    5mL

    Kinase Detection Buffer

    -20 °C

    5ml

    10mL

操作步骤

  • 试验体系及流程

    1、反应体系

    20 μL 反应体系中，各组分体积和浓度对照信息如下表所示

    　

    实验阶段反应体系体积

    总反应体系20 μL

    酶反应阶段（5μL）

    待测样品或阳性对照化合物

    1 μL

    ActRIIA

    2μL

    Substrate

    2μL (预混)

    ATP

    检测阶段（15μL)

    　

    　

    2，试剂准备

    请在室温解冻缓冲液，使用前平衡至室温。解冻后的缓冲液可长期存放于2-8 ℃。

    请在冰上解冻除缓冲液外的其他试剂，使用前平衡至室温。此类试剂需避免反复冻融，推荐按需分装成小管，妥善储存于推荐温度。

    请使用试剂盒内的缓冲液稀释和准备相关试剂，以确保实验结果的准确性和稳定性。

    3，试剂准备

    3.1 1X Assay buffer D 工作液配制

     Assay buffer 的储液为1X，使用前加入终浓度为50 μM 的DTT，即可配制成1X Assay

    buffer D工作液，用于后续配制化合物、蛋白、底物等工作液。每次需要现配现用。

    3.2 样品的配制

    使用1X Assay buffer D 工作液进行待测样品的配制。若样品的储液为DMSO，建议检测体系中DMSO 含量保持一致，在最终5 μL 反应体系中终浓度低于1%。

    ActRIIA 蛋白储液为0.5 mg/mL，使用1X Assay Buffer D工作液稀释成25 μg/mL，即可

    配制成2.5X 蛋白工作液，每孔用量2 μL，终浓度为10 μg/mL。例如取50μL ActRIIB

    储液加入到950 μL 1X Assay buffer 工作液中，即可得到1000 μL 2.5X 蛋白工作液。

    蛋白工作液需现配现用。初次使用后，建议将蛋白在冰上按需分装，于-80 ℃保存，避免,

    底物+ATP 溶液配制(2.5x): ATP 储液均为400X, Substrate 储液均为1000X。使用1X Assay Buffer D工作液对Substrate 和ATP 进

    行稀释，配制成2.5X 底物混合工作液，每孔用量2 μL。例如分别取2.5 μL Substrate 储液

    和6.25 μL ATP 储液加入到991.25 μL1X Assay buffer 工作液中，即可得到1000 μL 2.5X

    底物工作液。

    底物工作液需现配现用。初次使用后，建议将Substrate 和ATP 分别按需分装，于-20 ℃

    保存，避免反复冻融。

    4，操作步骤

    操作步骤

    阴性对照

    阳性对照

    待测样品

    第一步

    　

    1 μL

    1 μL

    1 μL

    1X Assay buffer D 工作液

    阳性对照

    配制好的待测样品

    第二步

    　

    2 μL

    2 μL

    1X Assay buffer D工作液

    2.5X 蛋白工作液

    第三步

    室温孵育 15 分钟

    室温孵育 15 分钟

    第四步

    　

    2 μL

    2.5X 底物工作液

    第五步

    室温孵育 40 分钟

    第六步

    5μLADP-Glo Reagent，室温孵育40分钟

    第七

    10μLKinase Detection Buffer，室温孵育30分钟

    第八步

    在酶标仪上进行读值并获取数据

  • 生物活性

评论(0)