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CyQuantiFluorTM Cell Viability Detection Kit

价格 1,050.00 1-2周
货号 UA079047
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背景介绍
  • 优爱生物的CyQuantiFluorTM细胞活力检测试剂盒包括DNA特异性结合染料和背景屏蔽染料。DNA特异性结合染料在无DNA结合的情况下只有微弱荧光,当其穿越活细胞膜进入细胞内并且和细胞内,主要是胞核内的DNA特异性结合后会激发出更强的荧光,其荧光强度和结合的DNA数量成正比,从而可以直接计算活细胞的数量。背景屏蔽染料不能穿越活细胞膜进入细胞内,但其可以屏蔽DNA结合染料和活细胞以外来源的DNA结合发出的荧光,例如死细胞细胞膜破裂释出的DNA,如此确保了只有和活细胞DNA结合的DNA结合染料发出的荧光才被检测到。CyQuantiFluorTM 细胞活力检测试剂盒的检测方法直接测量细胞膜完整的活细胞的DNA含量,不依赖细胞代谢状态,因此可以更准确的计数活细胞数,而其和DNA的特异性结合则进一步提高了结果的准确性。

    CyQuantiFluorTM细胞活力检测试剂盒为均质性试剂,只需一次加样即可进行检测,减少了多次加样可能导致的实验误差。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点,对于细胞增殖和细胞毒性实验中活细胞数量都可进行检测,尤其适合肿瘤细胞增殖检测和化合物的高通量筛选。

产品规格
  • 储存条件

    干冰运输。避光储存于-20℃。初次使用后可保存于4℃,长期保存建议按需分装保存于-20℃,避免反复冻融。有效期见试剂瓶标签。

产品组分
  • CyQuantiFluorTM 细胞活力检测试剂盒组分和规格如下。其中96-孔板和384-孔板的检测反应数按照每孔培养基体积分别为100μL25μL,每孔分别加入检测试剂100μL25μL计算。

    规格

    组分和规格

    检测96-孔板孔数

    检测 384-孔板孔数

    250 assays

    DNA结合染料:0.1 mL

    背景屏蔽染料:0.5 mL

    250

    1,000

    1250 assays

    DNA结合染料:0.5 mL

    背景屏蔽染料:2.5 mL

    1,250

    5,000

    12500 assays

    DNA结合染料:5 mL

    背景屏蔽染料:25 mL

    12,500

    50,000


操作步骤
  • 多数实验条件下应用CyQuantiFluorTM 细胞活力检测试剂盒不建议直接比较样品绝对读值。建议在每块实验板设定同样的参照物,例如肿瘤细胞增殖检测设定同样的毒性参照化合物和溶剂载体对照,实验样品读值用毒性参照化合物和溶剂载体对照读值归一化后再进行数据处理和比较。

    以下以96孔细胞培养板的检测为例。

    1)96-孔底部透明黑色细胞培养板接种合适密度的实验细胞100 μL

    2)根据实验需求进行细胞处理,例如肿瘤细胞增殖实验中加入相应的测试化合物并孵育一定时间

    3)细胞处理后取出CyQuantiFluorTM细胞活力检测试剂盒进行细胞活力检测

    4)2x CyQuantiFluorTM检测试剂配制:可以使用HBSS (Hank’s buffered saline solution), PBS, 含或不含血清的培养基等溶液配制2x检测试剂。按需取上述溶液,加入250xDNA结合染料和50x的背景屏蔽染料即可,例如测试一块96-孔实验板按需可配制12mL2x检测试剂,可以向11.7mLHBSS中加入48μLDNA结合染料240μL背景屏蔽染料即可。振荡混匀

    5)向每孔含有100μL培养基的96-实验细胞板加入100 μL 2x检测试剂。如果每孔含有其他体积的培养基,则应保持每孔含有的培养基和加入试剂的体积比为1 : 1

    6)37 5% CO2孵箱孵育。可以在加入检测试剂0.5hr-6hr读板,一般可以在1hr时读板。最佳读板时间和具体的细胞和实验条件有关,可以通过预实验优化。荧光信号强度一般在30min-60min达到最高,并且在6hr内基本保持稳定。注意如果测试细胞为悬浮细胞,读板前要确保细胞沉淀于实验板底,必要时可以低速离心细胞板使悬浮细胞沉淀于板底

    7)多功能读板仪上用FITC滤光片(Em 490nm/Ex 520nm)或类似滤光片于底部读取荧光信号

注意事项
  • 1)不同批次不建议混用
    2)非经严格验证,不建议改变检测试剂用量
    3)仅限科研用途

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