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UA-Luc 4 Lucia/Gaussia Luminescence Detection Kit

4 Luci/Gaussia荧光素酶检测试剂盒

价格 1,500.00 供应商现货 : 3-5个工作日
货号 UA079028
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背景介绍
  • 荧光素酶报告基因系统(Luciferase-based reporter gene system)被广泛应用于细胞内信号通路、转录因子调节、受体功能研究、高通量药物筛选等。胞内荧光素酶的表达能够定量进行检测,其工作原理是荧光素酶催化底物,发生转化,从而产生自发的冷光,发光的强度与荧光素酶的量成正相关。

    UA-Luc 4 Luci/Gaussia荧光素酶检测试剂盒为均质即用型(Homogeneous ready for use)试剂,通过“加入-混合-检测”简单步骤完成检测。该试剂盒用于检测带分泌型Luci/Gaussia荧光素酶报告基因转染的细胞的培养液中的荧光素酶活性,不需要裂解细胞,细胞可以用于其它分析。相比国外品牌同类产品检测灵敏度高一个数量级左右,尤其适合于低酶活性细胞分析及抑制性化合物的筛查。

产品规格
  • 分子别名

    4 Luci/Gaussia荧光素酶检测试剂盒
  • 储存条件

    4 Luci/Gaussia荧光素酶检测试剂盒储存于-20℃ 及以下性能稳定1年。配成的1x反应液可分装后避光-20℃ 保存1个月,4℃保存48hr, 避免反复冻融。

产品组分
  • Size
    Buffer
    Substrate
    Tests in 96-well plates
    Tests in 384-well plates
    500 tests25 ml250 μl5002,500
    5*500 tests5x 25 ml5 x 250μl2,50012,500

操作步骤
  • 1.根据实验设计,将表达分泌型Luci/Gaussia荧光素酶报告基因的细胞,铺于96孔或384孔反应板。
    2.根据实验要求对细胞进行化合物处理及报告基因刺激。
    3.于报告基因刺激后适当时间,例如24~48小时,收集细胞上清液,进行荧光素酶活性分析。
    4.实验前将UA-Luc 4 Luci/Gaussia荧光素酶检测试剂平衡至室温,轻摇混匀。
    5.根据需要量配制对应体积的1x反应液。试剂盒中的底物为100x,使用前用缓冲液配成1x反应液。
    6.向96-孔白色不透明板每孔加入20μl检测样本或对照样本,再向各孔加入50 μl检测试剂。
    7.在振板机上低速振荡10秒钟。
    8.立即在荧光读板仪上读取并记录荧光信号。

  • 生物活性

    • 信号稳定性检测: 5x10^4/ml的THP1-Dual细胞接种于12孔细胞培养板中,加3μg/ml终浓度的2'3'-cGAMP 刺激24小时后收集上清液进行酶活性分析。按试剂盒说明书进行检测,50μl 检测试剂加20 μl上清液,混匀后在不同时间检测荧光读数。(菱形线条是UA-Luc 4 Luci/Gaussia 检测结果,黑圆点线条是国外品牌产品检测结果,相同样本,样本用量也相同)

    • 检测灵敏度及Window 比对:5x10^4/ml的THP1-Dual细胞接种于12孔细胞培养板中,加3μ g/ml终浓度的2'3'-cGAMP 刺激24小时后收集上清液进行酶活性分析。按试剂盒说明书进行检测,50μl 检测试剂加20 μl上清液,混匀后在不同时间检测荧光读数。表中读数为检测2个重复孔的平均值。结果显示UA-Luc 4 Luci/Gaussia 在高中低酶浓度时均明显优于国外品牌产品,其检测灵敏度比国外品牌产品高1个数量级左右。

    • 信号窗口比对

    • 稳定性对比

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