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细胞活力检测有多种方法,如检测染料排除,ATP浓度变化,酶活性变化等。细胞检测有时需要进行细胞毒性的机制研究和/或设立内参对照,由此产生多重(multiplex) 分析需求,即对同一样品用多种分析方法检测,彼此检测机理不同,相互不干扰,如此可以进行相关对比,从而揭示细胞毒性的机制或排除系统差异。本公司的荧光细胞活力检测试剂盒(UA-Glo® Fluorescent Cell Viability Assay)对细胞活力的检测基于只存在于活细胞内的蛋白酶对多肽-荧光基团底物的降解会产生荧光信号,而细胞膜完整性受损时,该蛋白酶失去活性,不会产生荧光信号。UA-Glo® Fluorescent Cell Viability Assay与本公司的UA-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(目录号UA070103)检测原理不同,可以检测到更早期的轻微的细胞损害,两个检测可以兼容进行多重检测。 UA-Glo® Fluorescent Cell Viability Assay也与本公司的UA-Glo® Caspases 3/7 细胞凋亡检测试剂盒(目录号UA079012)兼容,可以进行多重检测以确定细胞毒性的机制。
分子别名
荧光细胞活力检测试剂盒储存条件
储存于-20℃ 及以下。有效期12个月。
蛋白酶底物,缓冲液混合后灌装于 10 ml 或 100 ml 的棕色瓶中及 2ml 管中,规格如下:
规格
CTF 底物
CTF 缓冲液
可检测的 96-孔板孔数
可检测的 384-孔板孔数
10 ml
100μl
10ml
100 wells
500 wells
5X10ml
5x100μl
5x10ml
500 wells
2,500 wells
2X50 ml
2x500μl
2x50ml
1,000 wells
5,000 wells
1. 初次使用后建议将底物分装-20℃保存,每次新鲜配制反应液。
2. 非经严格验证,不建议随意改变反应试剂用量。
生物活性
细胞毒药物抑制活性检测:5000细胞/孔的Hela细胞接种于96孔白板透明底培养板,加不同浓度的多西紫杉醇进行处理。65小时后取出,进行序贯荧光细胞活力检测-CTG细胞活力检测,所用体积是60μl medium-60μl荧光检测试剂-60μl CTG检测试剂。以未加药物处理的反应孔读数为100%,计算药物处理孔percentreading,作图求得IC50。
A.与B.分别是国外同类品牌产品及UA CTF的荧光检测结果,C.与D.分别是A.与B.CTF检测后进行的CTG检测结果。两种试剂盒,两种检测方法,获得的IC50均很接近,在6~9nM范围内。结果提示:荧光细胞活力检测试剂与CTG检测试剂相容;CTF检测试剂与国外同类品牌产品性能类似。HEK293细胞计数,分于96孔培养板板,每孔细胞数如表中所示。按产品说明书分别用UA CTF及国外同类品牌产品进行荧光细胞活力检测,图中读数代表两个重复60分钟读数的均数。结果提示两个试剂盒检测灵敏度类似。







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