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荧光素酶报告基因系统被广泛应用于细胞内信号通路、转录因子调节、受体功能研究、高通量药物筛选等。细胞内荧光素酶的表达能够进行定量检测,其工作原理是荧光素酶催化相应的底物而产生发光,发光的强度与荧光素酶的量呈正比。相对于传统的萤火虫或海肾荧光素酶报告基因,微荧光素酶(NanoLuc®)作为报告基因其蛋白分子量更小,更不容易受筛选化合物的非特异性影响,同时微荧光素酶催化的反应发光更强,因此检测灵敏度也有明显提高。
优爱生物的UA-Glo® 稳定型微荧光素酶检测试剂盒包括裂解缓冲液和专有的微荧光素底物。试剂盒为均质即用型试剂,一次加样可以同时进行细胞裂解和微荧光素酶检测,减少了多次加样可能导致的实验误差。UA-Glo® 稳定型微荧光素酶检测试剂盒具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点,尤其适合化合物的高通量筛选实验。
分子别名
Nano-Steady 荧光素酶检测试剂盒储存条件
干冰运输。-20℃及以下避光储存,有效期见试剂瓶标签。初次使用后建议将试剂按需分装避光-20℃及以下保存。长期保存(>2个月),底物建议-80℃保存。
UA-Glo® 稳定型微荧光素酶检测试剂盒组分和规格如下。可检测的96-孔和384-孔板反应数按照每孔样品分别为100 μL和20 μL,每孔分别加入100 μL和20 μL检测试剂计算。
规格
裂解缓冲液
微荧光素酶底物
检测96-孔板孔数
检测384-孔板孔数
10 mL
10 mL
50 μL
100
500
100 mL
100 mL
0.5 mL
1,000
5,000
10*10 mL
10 x 10 mL
10 x 50 μL
1,000
5,000
10*100 mL
10 x 100 mL
10 x 0.5 mL
10,000
50,000
1.不同批次不建议混用
2.非经严格验证,不建议改变检测试剂用量
3.仅限科研用途
4.NanoLuc是Promega公司注册商标
生物活性
Nano-Steady 荧光素酶检测试剂盒信号稳定性测试: 6x10^5/ml的HEK293 细胞接种于 6 孔细胞培养板中;24 小时后转染含 Nano 荧光素酶报告基因的质粒;转染后 48 小 时,将细胞转到 96 孔板中, 15000 cells/孔,细胞贴壁后,取出细胞在室温平衡 10 分钟,然后加入平衡至室温的 Nano-Steady 荧光素酶检测试剂,在不同时间点连续读取荧光值。
HEK293 细胞转染含 Nano 荧光素酶报告基因的质粒。转染后 48 小时,将细胞转到 96 孔板中,15000 cells/孔,每孔细胞数如表中所示,然后加入平衡至室温的 Nano-Steady 荧光素酶检测试剂检测,无细胞的培养液为空白对照。表中读数为检测20 分钟时每 2 个重复孔的平均值。







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