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UA-Glo® One-luc Luciferase Assay System

One-luc 荧光素酶检测试剂盒

价格 270.00 供应商现货 : 3-5个工作日
货号 UA079010
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背景介绍
  • UA-Glo® One-luc荧光素酶检测试剂盒可用于定量检测细胞中报告基因荧光素酶的表达水平。试剂盒为均质型试剂,只需一次加样就可进行检测,减少了多次加样可能导致的实验误差。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点,其稳定的辉光信号使该产品尤其适合化合物的高通量筛选实验。UA-Glo® One-luc荧光素酶检测试剂的化学稳定性更好,检测试剂在4保存5天,其检测信号强度的减弱低于15%,方便需要短时间内反复使用试剂盒的客户。

产品规格
  • 分子别名

    One-luc 荧光素酶检测试剂盒
  • 储存条件

    干冰运输。避光储存于-20℃ 及以下, 建议长期 (>3个月) 保存于-80℃,有效期见试剂瓶标签。初次使用后建议将试剂分装避光-20℃及以下保存。试剂可冻融不超过5次。短期连续使用时试剂可保存在4℃不超过5天。

产品组分
  • UA-Glo® One-luc荧光素酶检测试剂盒规格如下。可检测96-/384-孔板反应数按每孔加入100μL/20μL检测试剂计算。

    规格

    检测96-孔板孔数

    检测384-孔板孔数

    10 mL

    100

    5,00

    100 mL

    1,000

    50,00

    10 X100 mL

    10,000

    50,000

操作步骤
  • UA-Glo® One-luc荧光素酶检测试剂盒通过荧光素酶反应检测细胞中萤火虫荧光素酶报告基因的活性。荧光素酶反应有极高的灵敏度,并且pH, 温度,实验系统设定等参数对反应均有较大影响,多数实验条件下不建议直接比较样品绝对检测值。建议在每块实验板设定同样的参照物对照,实验样品检测值用参照物对照和溶剂载体对照检测值归一化后再进行数据处理和比较。

    1. 根据实验需求在96孔或384孔白色透明细胞培养板接种合适密度的表达萤火虫荧光素酶报告基因的实验细胞

    2. 根据实验需求进行细胞处理后进行荧光素酶报告基因检测

    3. 取出UA-Glo® One-luc荧光素酶检测试剂。检测试剂完全融化后平衡至室温 (22-25),颠倒充分混匀。荧光素酶反应对温度变化敏感。检测试剂和实验细胞板需要平衡至室温,测试过程温度保持恒定 (±1)

    4. 取出实验细胞板,平衡至室温

    5. 实验细胞板每孔加入与孔内培养液相等体积的检测试剂,例如100 µL 96孔板细胞中加入100µL 检测试剂, 20µL 384 孔板细胞中加入20µL 检测试剂

    6. 中速振板1min,放置暗处孵育10min稳定发光信号

    7. 在发光或多功能读板仪上读取发光信号,建议在1hr内读板

注意事项
  • 1) 不同批次不建议混用

    2) 非经严格验证,不建议改变检测试剂用量

    3) 仅限科研用途


  • 生物活性

    • 上图将 10min的检测值设为1,计算其他时间点的检测值和10min检测值的比值。以对10min归一化的数据对检测时间作图,结果表明UA-Glo One-luc荧光素酶检测试剂信号稳定性和PC品牌试剂相仿

    • 上图显示10min时对转染萤火虫荧光素酶报告基因的HEK293细胞的检测结果。 结果表明UA-Glo One-luc荧光素酶检测试剂和PC品牌试剂在检测线性(50,000和5,000细胞检测值之比)和背景检测值(含10% FBS 的DMEM)相仿, 而UA-Glo One-luc荧光素酶检测试剂检测值明显高于PC品牌试剂。注意Y-坐标为对数以显示背景值。

    • UA-Glo® One-luc 和 Bio-luc 和 GM One-Step 2.0 荧光素酶检测试剂盒对比的测试结果表明 UA-Glo® One-luc 和 Bio-luc 荧光素酶检测试剂的检测值更高 (2倍于GM One-Step 2.0 ),三个试剂盒的检测线性R2 均>0.99,检测背景(无细胞 DMEM+10%FBS) 均很低(分别为60,20, 50 RLU)。

    • 细胞数量灵敏度测试

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