产品介绍 评论(0)
微分裂荧光素酶技术(Nano luciferase split enzyme technology)将荧光素酶蛋白分子分成两个不同的片段,分别表达,两个片段具有高亲和力,在同一反应体系中可以快速自动生成具有荧光素酶活性的完整的酶分子。检测微分裂荧光素酶活性可以用于细胞内目标蛋白的表达水平,相互作用,动态变化等研究。
微分裂荧光素酶细胞外检测试剂盒提供细胞非裂解缓冲液,反应底物,而反应体系的分裂荧光素酶小片段则克隆在表达载体上,并与目标蛋白表达在同一分子上,作为目标蛋白分子的标签,该目标蛋白是分泌型的或存在于细胞膜胞外。带分裂荧光素酶小片段标签的目标蛋白表达载体由用户构建,制备,并完成对细胞的转染。
分子别名
微分裂荧光素酶细胞外检测试剂盒储存条件
干冰运输。-20℃及以下避光储存,有效期12个月。长期保存,底物建议-80℃保存。底物初次使用后应分装并保存于-20℃及以下,避免冻融次数超过3次以上。
缓冲液,底物分别混灌装于 10 ml 或 100 ml 的棕色瓶及 2ml 的螺旋管中,规格如下:
缓冲液
底物
检测的 96-孔板
孔数
检测的 384-孔板
孔数
10 ml
50ml
100
500
100 ml
0.5ml
1,000
5,000
10X100 ml
10X0.5ml
10,000
50,000
1. 试剂量:非经严格验证,不建议随意改变反应试剂用量。
2. 不同批次的试剂不建议混合使用。
3. 分装储存:按照说明书分装储存反应试剂,保证试剂的稳定性。
生物活性
UA-Glo 微分裂荧光素酶细胞外检测试剂灵敏度实验
HEK293细胞接种于6孔培养板,细胞密度为80-90%。转染带分泌型分裂酶小片段标签的目标分子表达质粒,转染24hr后将细胞重悬于DMEM(10%FBS)培养基,加细胞到 96孔白框透明细胞板中, 1250 细胞/孔,每孔50μL。24hr后取出细胞板进行测试:加入平衡至室温的UA-Glo微分裂荧光素酶细胞外检测试剂,10min检测,读值和S/B (转染细胞和DMEM(10%FBS)比值)UA-Glo微分裂荧光素酶细胞外检测试剂稳定性测试:
HEK293细胞接种于6孔培养板,细胞密度为80-90%。转染带分泌型分裂酶小片段标签的目标分子表达质粒,转染24hr后将细胞重悬于DMEM(10%FBS)培养基,加细胞到 96孔白框透明细胞板中, 1250 细胞/孔,每孔50μL。24hr后取出细胞板进行测试:加入平衡至室温的检测试剂,在10min-60min进行检测,以10min读值为100% 的信号进行稳定性作图
UA-Glo 微分裂荧光素酶细胞外检测试剂信号半衰期>2hr。







评论(0)