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微分裂荧光素酶技术 (Nano-luc Split Enzyme Technology) 将微荧光素酶 (NanoLuc® Luciferase) 分成具有高亲和力的两个片段 :大片段和小片段。微荧光素酶小片段以目标蛋白标签的形式表达,在同一反应体系中可以和微荧光素酶大片段快速结合为具有微荧光素酶活性的完整的酶分子。检测微荧光素酶大片段和小片段结合所致的微荧光素酶活性可以用于细胞内蛋白的表达,调控和降解以及蛋白相互作用等领域的研究。
优爱生物微分裂荧光素酶裂解型检测试剂盒(Nano-luc Lytic Detection System)包括专有的细胞裂解液和微荧光素酶底物。该试剂盒具有检测灵敏度高,背景低,检测范围广,检测信号稳定(半衰期约3hr)的优点,特别适合化合物的高通量筛选。
分子别名
微分裂荧光素酶裂解型检测试剂盒储存条件
干冰运输。-20℃及以下避光储存,有效期12个月。长期保存(>4周),底物建议-80℃保存。底物初次使用后应分装并保存于-20℃及以下。检测试剂建议按需新鲜配制,剩余的检测试剂可以-20℃或-80℃保存。
规格
细胞裂解液
微荧光素酶底物
96-孔板检测孔数
384-孔板检测孔数
10 ml
10 ml
50μl
100
500
100 ml
100 ml
0.5ml
1,000
5,000
10*100 ml
10X100 ml
10X0.5 ml
10,000
50,000
1. 本产品仅作科研用途。
2. 不同批次的试剂不建议混合使用。
3. 非经严格验证,不建议随意改变检测试剂用量。
4. 按照说明书分装储存检测试剂,保证试剂的稳定性。
生物活性
微分裂荧光素酶裂解型活性检测: HEK293 细胞接种于 96 孔白板透明底培养板,100µl/孔,细胞密度为 60-70%。转染带分裂酶小片段标签的目标分子表达质粒,每孔 0.2µg DNA,48 小时后按说明书检测 Nanoluc 荧光素酶活性,动态读板 2
小时*HEK293 细胞接种于 6 孔白板透明底培养板,细胞密度为 60-70%。转染带分裂酶小片段标签的目标分子表达质粒,每孔0.2µg DNA。48 小时后细胞酶消化,计数后系列稀释,铺于 96 孔反应板,按说明书检测 Nanoluc 荧光素酶活性。对照用未转染细胞。比对试剂盒为国外知名品牌同类产品。表中读数为 2 个重复孔的平均读数。
A: Fluc activity after R1 addition
B: Remaining FLuc activity after R1+R2 addition
C: Nluc activity after R1+(R2+Sub) addition
Remaining Fluc actity afer R2 Addition (%)=0.037%
稳定性测试







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