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双荧光素酶报告基因在哺乳动物细胞功能的研究方面具有广泛的应用，包括细胞代谢，信号通路，转录因子，基因功能，药物筛选等。在双荧光素酶报告系统中，一个荧光素酶作为实验报告基因显示所研究靶标的活性；另一个荧光素酶作为对照报告基因，用于标准化实验报告基因的活性，从而最大限度地减少因为转染效率、细胞数量、细胞裂解效果、加样体积等导致的实验误差。UA-Glo双荧光素酶检测试剂盒可以对同一样品检测萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶的表达，具有灵敏度高、稳定性好、重复性好、使用便捷的优点。
分子别名
双荧光素酶检测试剂盒储存条件
干冰运输。避光储存于-20℃ 及以下，R2底物于-80℃保存。建议长期 (>2个月) 保存于-80℃，有效期见试剂标签。初次使用后建议将试剂分装避光-20℃及以下保存。
UA-Glo双荧光素酶检测试剂盒由R1试剂，R2缓冲液和R2底物组成。具体规格如下表。可检测的96-孔/384-孔板孔数按每孔培养液体积为50/20mL，加入R1试剂50/20mL和R2试剂50/20mL计算。
规格
R1试剂
R2缓冲液
R2底物
可检测96-孔板孔数
可检测384-孔板孔数
10 mL
10 mL
10 mL
100μL
200
5,00
100 mL
100 mL
100 mL
1 mL
2,000
5,000
10x100 mL
10x100 mL
10x100 mL
10x1 mL
2,000
50,000
1) 不同批次不建议混用
2) 非经严格验证，不建议改变检测试剂用量
3) 仅限科研用途
生物活性
双荧光素酶活性检测： HEK293 细胞接种于 96 孔白板透明底培养板，100µl/孔，细胞密度为 60%。隔日转染 pCMVFluc 及 pCMV-Rluc 质粒，每孔 0.2µg DNA，48 小时后检测双荧光素酶活性。图中数值代表 4 孔重复平均值。A: 加了 R1 试剂后的荧光读数；B：加入 R1 试剂读值后，继续加 R2 缓冲液(无底物)后的荧光读数；C：加入 R1 试剂读值后，继续加 R2 1x 工作液后的荧光读数。
*HEK293 细胞接种于 6 孔细胞培养板中，转染 Fluc 及 Rluc 表达质粒；转染 48 小 时后，酶消化细胞，计数，再分入 96 孔反应板中，每孔的细胞数如表中所示，然后加入平衡至室温的 UA-Glo 双荧光素酶检测试剂检测，未转染的细胞为对照，在不同时间点连续读取荧光值，计算读数比。比对试剂是国外知名品牌同类产品。
A: Fluc activity after R1 addition
B: Remaining FLuc activity after R1+R2 addition
C: Rluc activity after R1+(R2+Sub) addition
稳定性检测
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