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UA-Glo® Bright Luciferase Assay System

高光度荧光素酶检测试剂盒

价格 385.00 供应商现货 : 3-5个工作日
货号 UA070105
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产品介绍 评论(0)

背景介绍
  • UA-Glo® 高光度荧光素酶检测试剂盒可用于定量检测细胞中报告基因荧光素酶的表达水平。均质即用型配方只需一次加样就可进行检测,减少了多次加样可能导致的实验误差。该产品具有灵敏度高,且信号半衰期 > 0.5hr,使该产品尤其适合低荧光素酶表达水平样品的高通量的检测。

产品规格
  • 分子别名

    高光度荧光素酶检测试剂盒
  • 储存条件

    干冰运输。避光储存于-20℃ 及以下, 建议长期 (>3个月) 保存于-80℃,有效期见试剂瓶标签。初次使用后建议将试剂分装避光-20℃及以下保存。试剂可冻融不超过5次。试剂储存于4℃ 24hr,室温(22℃)5hr 不影响功能,活力保持>90%。


产品组分
  • UA-Glo® 高光度荧光素酶检测试剂盒组分和规格如下。可检测96-/384-孔板反应数按每孔加入100μL/20μL检测试剂计算。

    规格

    检测96-孔板反应数

    检测 384-孔板反应数

    10 mL

    100

    500

    100 mL

    1,000

    5,000

    10X100 mL

    10,000

    50,000

操作步骤
  • UA-Glo® 高光度荧光素酶检测试剂盒通过荧光素酶反应检测细胞中萤火虫荧光素酶报告基因的活性。荧光素酶反应有极高的灵敏度,并且pH, 温度,实验系统设定等参数对反应均有较大影响,多数实验条件下不建议直接比较样品绝对读值。建议在每块实验板设定同样的参照物对照,实验样品读值用参照物对照和溶剂载体对照读值归一化后再进行数据处理和比较。

    1. 根据实验需求在96孔或384孔白色透明细胞培养板接种合适密度的表达萤火虫荧光素酶报告基因的实验细胞
    2. 根据实验需求进行细胞处理后进行细胞荧光素酶的表达水平检测
    3. 取出UA-Glo® 高光度荧光素酶检测试剂。检测试剂完全融化后平衡至室温 (22-25),颠倒充分混匀
    4. 取出实验细胞板,平衡至室温。荧光素酶反应对温度变化敏感。检测试剂和实验细胞板需要平衡至室温,测试过程温度保持恒定 (±1)

    5. 实验细胞板每孔加入与孔内培养液相等体积的UA-Glo® 高光度荧光素酶检测试剂,例如100 µL 96孔板细胞中加入100µL 检测试剂, 20µL 384 孔板细胞中加入20µL 检测试剂

    6. 中速振板1min,放置暗处孵育10min稳定发光信号
    7. 在发光或多功能读板仪上读取发光信号,最好在30min内读板
注意事项
  • 1) 不同批次不建议混用

    2) 非经严格验证,不建议改变检测试剂用量

    3) 仅限科研用途


  • 生物活性

    • HEK293 细胞接种于 96 孔细胞培养板中;5 小时后转染荧光素酶表达质粒;转染48 小 时后,取出细胞在室温平衡 10 分钟,然后加入平衡至室温的 UA-Glo稳定型及高光度荧光素酶检测试剂,混匀,在不同时间点连续读取荧光值

    • HEK293细胞接种于6孔培养板,细胞密度为80-90%。转染表达萤火虫荧光素酶报告基因的质粒,转染后48hr将细胞重悬于DMEM(10%FBS)培养基,加细胞到 96孔白框透明细胞板中,80,000细胞/孔,每孔50μL。加入50μL平衡至室温的UA-Glo 高光度荧光素酶检测试剂后在10min进行检测,结果如图:高光度荧光素酶检测试剂检测信号强度高,信号半衰期超过50min。

    • 细胞数量灵敏度测试

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