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产品中心 其他检测试剂盒 荧光素酶检测试剂盒

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UA-Glo® Steady Luciferase Assay System

稳定型荧光素酶检测试剂盒

价格 ￥300.00 （ 供应商现货 ： 3-5个工作日）
货号 UA070104
规格
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产品介绍

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背景介绍

  • UA-Glo® 稳定型荧光素酶检测试剂盒可用于定量检测细胞中报告基因荧光素酶的表达水平。试剂盒为均质型试剂，只需一次加样就可进行检测，减少了多次加样可能导致的实验误差。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点，其稳定的辉光信号使该产品尤其适合化合物的高通量筛选实验。

产品规格

  • 分子别名

    稳定型荧光素酶检测试剂盒

  • 储存条件

    干冰运输。避光储存于-20℃ 及以下, 建议长期 (>3个月) 保存于-80℃，有效期见试剂瓶标签。初次使用后建议将试剂分装避光-20℃及以下保存。试剂可冻融不超过5次。


产品组分

  • UA-Glo® 稳定型荧光素酶检测试剂盒规格如下。可检测96-/384-孔板反应数按每孔加入100μL/20μL检测试剂计算。

    规格

    检测96-孔板孔数

    检测384-孔板孔数

    10 mL

    100

    5,00

    100 mL

    1,000

    50,00

    10 X100 mL

    10,000

    50,000

操作步骤

  • UA-Glo® 稳定型荧光素酶检测试剂盒通过荧光素酶反应检测细胞中萤火虫荧光素酶报告基因的活性。荧光素酶反应有极高的灵敏度，并且pH, 温度，实验系统设定等参数对反应均有较大影响，多数实验条件下不建议直接比较样品绝对检测值。建议在每块实验板设定同样的参照物对照，实验样品检测值用参照物对照和溶剂载体对照检测值归一化后再进行数据处理和比较。

    1. 根据实验需求在96孔或384孔白色透明细胞培养板接种合适密度的表达萤火虫荧光素酶报告基因的实验细胞

    2. 根据实验需求进行细胞处理后进行荧光素酶报告基因检测

    3. 取出UA-Glo® 稳定型荧光素酶检测试剂。检测试剂完全融化后平衡至室温 (22℃-25℃)，颠倒充分混匀。荧光素酶反应对温度变化敏感。检测试剂和实验细胞板需要平衡至室温，测试过程温度保持恒定 (±1℃)

    4. 取出实验细胞板，平衡至室温

    5. 实验细胞板每孔加入与孔内培养液相等体积的检测试剂，例如100 µL 96孔板细胞中加入100µL 检测试剂, 20µL 384 孔板细胞中加入20µL 检测试剂

    6. 中速振板1min，放置暗处孵育10min稳定发光信号

    7. 在发光或多功能读板仪上读取发光信号，可以在2-3hr内读板

注意事项

  • 1) 不同批次不建议混用

    2) 非经严格验证，不建议改变检测试剂用量

    3) 仅限科研用途


  • 生物活性

    • UA-Glo稳定型荧光素酶检测试剂盒信号稳定性测试： HEK293 细胞接种于 96 孔细胞培养板中；5 小时后转染荧光素酶表达质粒；转染48 小 时后，取出细胞在室温平衡 10 分钟，然后加入平衡至室温的 UA-Glo稳定型及高光度荧光素酶检测试剂，混匀，在不同时间点连续读取荧光值

    • *HEK293 细胞接种于 6 孔细胞培养板中，转染荧光素酶表达质粒；转染 48 小 时后，酶消化细胞，计数，再分入 96 孔反应板中，每孔的细胞数如表中所示，然后加入平衡至室温的UA-Glo稳定型检测试剂检测，未转染的细胞为对照，在不同时间点连续读取荧光值，计算读数比。比对试剂是国外知名品牌同类产品。

    • UA-Glo稳定型荧光素酶检测试剂盒细胞报告基因检测. 转染了报告基因载体的细胞铺于 384 孔板，细胞密度 5x10E5/ml。加不同浓度的化合物，培养 24 小时。然后采用稳定型荧光素酶试剂盒检测酶活性，检测试剂盒分别是国际品牌 Px 公司产品及UA-Steady 产品。
      化合物 A，化合物 B 分别代表强活性及弱活性化合物。结果显示两产品 IC50 差异均在 2 倍之内。

    • 细胞数量灵敏度测试

    • 稳定性测试

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