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产品中心 蛋白 酶制剂

Lysyl Endoproteinase (Lys-C)

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货号 UA070034
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产品介绍

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产品规格

  • 物种

    Lysobacter enzymogenes

  • 表达宿主

    E.coli

  • 分子量

    31±3.1kD

  • 标记

    Unconjugated

  • 标签

    No Tag

  • 性状

    Lyophilized Powder

  • 缓冲体系

    20mM Tris-HCL, pH 8.0

  • 储存条件

    产品采用冰袋或干冰运输，收到产品后请立即将其置于-20℃以下储存，有效期一年。用去 离子水或25mmol/L Tris-HCl (pH8.5)溶解后于2~8℃可以保存7天。建议用25mmol/L Tris-HCl (pH8.5)稀释至所需浓度后分装，-20℃保存6个月内使用，溶解后避免反复冻融。

背景介绍

  • 赖氨酸内切酶 Lys-C（ Lysyl endopeptidase)属于丝氨酸蛋白酶家族，能特异性水解赖氨酸残基羧基 端肽键。Lys-C 在 pH 范围 7.0-9.0 时活性最佳。水解反应既可在溶液中进行，也可在凝胶中进行。可用于 重组胰岛素及类似物生产；蛋白类、抗体类药物的质量检测；蛋白质质谱、测 序、肽图谱分析；小分子蛋白或多肽的生产; 某些特殊化合物的酶促合成等。

操作步骤

  • 1. 目的蛋白处理：用酶切缓冲液（如 25~50mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH8.5）溶解目 的蛋白；若目的蛋白溶解度低，可以考虑对目的蛋白进行变性（如添加尿素、SDS）、 二硫键还原、烷基化处理等。

    注意：为消除变性剂的影响，蛋白质溶液也要相应的用缓冲液稀释，如使用 8M 尿 素变性后至少稀释 4 倍，使尿素浓度≤2M；

    2. 酶切条件：Lys-C 蛋白酶与目的蛋白质量比=1:20~1:1000，适宜 pH7.0~9.5。反应温 度为 30~37℃，反应时间 1~24 小时。

酶活定义
  • 1个酶活力单位定义：在37℃， pH9.0条件下，1分钟内催化生成1μmol AC-Lys-pNA所需的 酶量为一个活力单位。

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