CD8⁺T细胞毒性活性测定流程

CD8⁺T细胞毒性活性测定流程概述

斯达特提供从样本制备到功能验证的CD8⁺T细胞毒性活性测定全流程支持。产品覆盖磁珠分选、细胞共培养、杀伤检测及流式分析等核心环节

全流程覆盖，一站式配置

高纯度分选，保证效应细胞质量

多维度功能验证

抗原特异性识别能力

🧬 CD8⁺T细胞毒性活性测定流程

📋 1. CD8⁺T细胞毒性活性测定流程有哪些步骤？

① 靶细胞准备
选取并培养适宜的目标细胞系（如肿瘤细胞），根据实验设计进行荧光标记（如CFSE）或预先加载特定抗原，以作为后续检测中的被杀伤对象。

② CD8⁺T细胞分选
从供体（人外周血或小鼠脾脏等）来源的淋巴细胞中，通过免疫磁珠分选或流式细胞分选技术，高纯度地分离获取CD8⁺T细胞。

③ 效应细胞-靶细胞共培养
将分选获得的CD8⁺T细胞（效应细胞）与准备好的靶细胞，按预设的效靶比例于培养板中共同孵育，模拟体内杀伤过程。

④ CD8⁺T细胞杀伤检测
在共培养特定时间后，采用终点法（如乳酸脱氢酶释放法、钙黄绿素释放法）或实时动态监测法（如xCELLigence系统）定量检测靶细胞的裂解程度，以此表征CD8⁺T细胞的直接细胞毒性活性。

⑤ 流式细胞术与ELISPOT分析
流式细胞术分析：可检测共培养后靶细胞的凋亡/坏死标志物（如Annexin V/PI），或胞内细胞因子（如IFN-γ、TNF-α）的表达，从单细胞水平评估杀伤功能及相关免疫表型。
ELISPOT分析：通过检测由CD8⁺T细胞释放的效应分子（如IFN-γ），在单细胞水平定量评估抗原特异性T细胞的频率与功能，作为细胞毒性活性的间接且灵敏的补充指标。

📊 2. CD8⁺T细胞毒性活性测定流程图

🛒 3. CD8⁺T细胞毒性活性测定实验相关产品推荐

一、Human外周血样本制备
用途	产品编号	产品名称
PBMC制备	abs930	外周血淋巴细胞分离液
PBMC保存液	570911	OMICS-Guard Sample Preservation Buffer
二、CD8 T细胞分选
用途	产品编号	产品名称
磁珠	S0B5741	CD8 Nanobeads, human
分选套装	S0D3007	Starter MagSep Separator (4L) kit
分选Buffer	S0D3018	Starter MagSep Separation Buffer
流式检测	S0B5007	FITC Mouse Anti-Human CD8 Antibody
三、细胞共培养
用途	产品编号	产品名称
培养板	abs7035	细胞培养板（标准透明24孔板）
培养基	abs9484	RPMI 1640培养基
IL-2	UA100004	IL-2 Protein, Human
血清	abs972	胎牛血清（优级）
CD3+CD28激活	S0F0051	Human CD3 CD28 T Cell Activation Magnetic Beads
MHC四聚体	UA089090	UA-MHC HLA-A*0201 /SLLMWITQV NY-ESO-1 Tetramer-APC Labelled
四、CD8+T细胞杀伤检测
用途	产品编号	产品名称
ELISPOT	S0P2001	StepSlim Human IFN-γ（HRP）plus ELISpot Kit
ELISA	S0C3100	Human IFN-γ OneStep OptiQuant Plus ELISA Kit
流式检测	S0B5906	CD3 APC-CY7
流式检测	S0B8234	CD8 PerCP-CY5.5
流式检测	abs9106	CFSE
流式检测	561142	颗粒酶B PE
流式检测	563576	穿孔素 APC
流式检测	562988	IFN BV421
流式检测	571397	CD69 RY775

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