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产品中心 有柱分选 阳性分选

所有图片（1/1）

CD11c Nanobeads Kit, mouse (RUO)

价格 ￥3,000.00 （ 供应商现货 ： 3-5个工作日）
货号 S0K0022
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产品介绍

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产品规格

  • 反应种属 ?

    Mouse

  • 储存条件

    避光保存于 2–8 ℃，不可冻存。

  • 成分组成

    偶联抗鼠CD11c单抗的葡聚糖包覆的四氧化三铁纳米磁珠，PBS 缓冲体系含 BSA 及Poloxamer 188。

  • 分选能力

    1 mL磁珠：适用于 1×109 总细胞量，最多可完成 100 次分选。

    2 mL磁珠：适用于 2×10⁹ 总细胞量，最多可完成 200 次分选。

  • 分选原理

    采用CD11c Nanobeads, mouse对CD11c⁺细胞进行磁性标记。随后将细胞悬液上样至置于分选器磁场中的分选柱内。被磁性标记的CD11c⁺细胞将滞留于柱内，未标记的细胞则流出，该组分即为去除CD11c⁺细胞后的阴性组分。将分选柱移出磁场后，被磁捕获的CD11c⁺细胞可洗脱获得，即为阳性分选组分。

  • 分选应用

    从小鼠脾脏单细胞悬液中分离或去除CD11c+细胞。

  • 磁珠粒径

    20 nm

  • 分选方式

    有柱分选

  • 分选策略

    阳性分选
背景介绍

  • CD11c Nanobeads专为从小鼠淋巴、非淋巴组织的单细胞悬液中分选 CD11c 阳性细胞（如树突状细胞 DC）而研发。与人类细胞不同，小鼠体内所有已知树突状细胞亚群均表达 CD11c，部分组织巨噬细胞亚群同样表达该标志物。使用这款CD11c 磁珠，即可摒弃树突状细胞分离繁琐复杂的传统步骤，改用一套简便快捷的阳性分选方案。

操作步骤
  • Note：本试剂盒不包含分选buffer，需自备，斯达特对应货号为 S0D3018

    以S Separation Column为例

    步骤

    操作方法

    剂量 / 时间

    磁性标记

    1

    取小鼠脾脏，置于40 μm无菌滤网上研磨，制备脾脏单细胞悬液；裂红处理后进行细胞计数

    Note: 推荐细胞采用AO/PI染色后进行计数

    —

    2

    细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清

    400×g,7 min

    3

    每1×10⁷细胞加90 μL缓冲液重悬

    Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整

    重悬细胞

    4

    每1×10⁷细胞加10 μL CD11c Nanobeads

    Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加

    1×10⁷细胞加 10 μL

    5

    充分混匀，2–8℃避光孵育15min

    孵育15 min

    6

    每1×10⁷细胞加1 mL缓冲液洗涤，400×g 离心7分钟，完全吸弃上清

    1×10⁷细胞加1 mL

    7

    500 μL缓冲液最多重悬1×108细胞

    重悬细胞

    磁性分选

    8

    将S型分选柱放入对应磁力分选器磁场中，500 μL缓冲液润洗分选柱

    润洗分选柱

    9

    将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）

    —

    10

    缓冲液洗涤柱子3次，每次500μL，待柱内液体完全流空后再加下一次

    3×500 μL缓冲液

    11

    合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上

    —

    12

    向柱内加入1mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞

    Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次

    收集目的细胞


    以L Separation Column为例

    步骤

    操作方法

    剂量 / 时间

    磁性标记

    1

    计数细胞总数取小鼠脾脏，置于40 μm无菌滤网上研磨，制备脾脏单细胞悬液；裂红处理后进行细胞计数

    Note: 推荐细胞采用AO/PI染色后进行计数

    —

    2

    细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清

    400×g,7 min

    3

    每1×10⁷细胞加90 μL缓冲液重悬

    Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整

    重悬细胞

    4

    每1×10⁷细胞加10 μL CD11c Nanobeads

    Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加

    1×10⁷细胞加 10 μL

    5

    充分混匀，2–8℃避光孵育15min

    孵育15 min

    6

    每1×10⁷细胞加1 mL缓冲液洗涤，400×g离心7分钟，完全吸弃上清

    1×10⁷细胞加1 mL

    7

    500 μL缓冲液最多重悬1×108细胞

    重悬细胞

    磁性分选

    8

    将L型分选柱放入对应磁力分选器磁场中，3 mL缓冲液润洗分选柱

    润洗分选柱

    9

    将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）

    —

    10

    缓冲液洗涤柱子3次，每次3 mL，待柱内液体完全流空后再加下一次

    3×3 mL缓冲液

    11

    合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上

    —

    12

    向柱内加入5mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞

    Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次

    收集目的细胞


  • 验证数据

    • 使用CD11c Nanobeads Kit, mouse、S（L）分选柱和分选器，从小鼠脾脏单细胞悬液中分离了CD11c阳性细胞。随后使用APC Armenian Hamster Anti-Mouse CD11c Antibody (N418) (STD Cat: S0B5085)及FITC Rat Anti-Mouse I-A/I-E Antibody (M5/114.15.2) (STD Cat: S0B1661)进行荧光染色，并圈选活细胞群进行分析。

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