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产品中心 有柱分选 阳性分选

所有图片（1/1）

CD11b NanoBeads, human and mouse（RUO）

价格 ￥1,700.00 （ 供应商现货 ： 3-5个工作日）
货号 S0K0007
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产品介绍

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产品规格

  • 反应种属 ?

    Human, Mouse

  • 储存条件

    避光保存于 2–8 ℃，不可冻存。

  • 成分组成

    偶联抗人及抗小鼠CD11b单抗的葡聚糖包覆的四氧化三铁纳米磁珠，PBS 缓冲体系含 BSA及Poloxamer 188。

  • 分选能力

    1.用于人全血或小鼠骨髓细胞：每10⁷个细胞加入20 μL纳米磁珠，最多可进行100次分离。2.用于人PBMC：每10⁷个细胞加入6 μL纳米磁珠，最多可进行333次分离。3.用于小鼠脾细胞：每10⁷个细胞加入2 μL 纳米磁珠，最多可进行1000次分离。

  • 分选原理

    采用CD11b NanoBeads, human and mouse对CD11b⁺细胞进行磁性标记。随后将细胞悬液上样至置于分选器磁场中的分选柱内。被磁性标记的CD11b⁺细胞将滞留于柱内，未标记的细胞则流出，该组分即为去除CD11b⁺细胞后的阴性组分。将分选柱移出磁场后，被磁捕获的CD11b⁺细胞可洗脱获得，即为阳性分选组分。

  • 磁珠粒径

    20 nm

  • 分选方式

    有柱分选

  • 分选策略

    阳性分选
背景介绍

  • CD11b NanoBeads, human and mouse旨在根据CD11b抗原的表达对人源及小鼠来源的细胞进行分离。在人类中，CD11b在髓系细胞上强表达，在NK细胞及部分活化淋巴细胞上弱表达。在小鼠中，CD11b抗原表达于单核细胞/巨噬细胞上，在粒细胞、NK细胞、CD5+ B1细胞及部分树突状细胞亚群上表达水平较低。该CD11b（Mac-1 α 链；整合素αM链）抗体可与CD11b/CD18异二聚体（Mac-1，αMß2整合素）中170 kDa的αM亚基结合。其作为补体（C3bi）、纤维蛋白原或凝血因子X的受体发挥功能。

操作步骤
  • Note：本试剂盒不包含分选buffer，需自备，斯达特对应货号为 S0D3018

    以S Separation Column为例

    步骤

    操作方法

    剂量 / 时间

    磁性标记

    1

    计数细胞总数

    —

    2

    细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清

    400×g,7 min

    3

    当处理人全血或小鼠细胞时：每1×10⁷总细胞用80 μL缓冲液重悬细胞沉淀；

    当处理PBMC时：每1×10⁷总细胞用94 μL缓冲液重悬细胞沉淀

    Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整

    重悬细胞

    4

    当处理人全血或小鼠细胞时：每1×10⁷ 总细胞加入20 μLCD11b NanoBeads；

    当处理PBMC时：每1×10⁷总细胞加入6 μL CD11b NanoBeads,

    Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加

    加入磁珠

    5

    充分混匀，2–8℃避光孵育15min

    孵育15 min

    6

    每 1×10⁷细胞加 1 mL缓冲液洗涤，400×g 离心7分钟，完全吸弃上清

    1×10⁷细胞加1 mL

    7

    500 μL缓冲液最多重悬1×108细胞

    重悬细胞

    磁性分选

    8

    将S型分选柱放入对应磁力分选器磁场中，500 μL缓冲液润洗分选柱

    润洗分选柱

    9

    将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）

    —

    10

    缓冲液洗涤柱子3次，每次500μL，待柱内液体完全流空后再加下一次

    3×500 μL缓冲液

    11

    合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上

    —

    12

    向柱内加入1mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞

    Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次

    收集目的细胞


    以L Separation Column为例

    步骤

    操作方法

    剂量 / 时间

    磁性标记

    1

    计数细胞总数

    —

    2

    细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清

    400×g,7 min

    3

    当处理人全血或小鼠细胞时：每1×10⁷总细胞用80 μL缓冲液重悬细胞沉淀；

    当处理PBMC时：每1×10⁷总细胞用94 μL缓冲液重悬细胞沉淀

    Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整

    重悬细胞

    4

    当处理人全血或小鼠细胞时：每1×10⁷ 总细胞加入20 μLCD11b NanoBeads；

    当处理PBMC时：每1×10⁷总细胞加入6 μL CD11b NanoBeads

    Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加

    加入磁珠

    5

    充分混匀，2–8℃避光孵育15min

    孵育15 min

    6

    每1×10⁷细胞加 1 mL缓冲液洗涤，400×g 离心7分钟，完全吸弃上清

    1×10⁷细胞加1 mL

    7

    500 μL缓冲液最多重悬1×108细胞

    重悬细胞

    磁性分选

    8

    将L型分选柱放入对应磁力分选器磁场中, 3 mL缓冲液润洗分选柱

    润洗分选柱

    9

    将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）

    —

    10

    缓冲液洗涤柱子3次，每次3 mL，待柱内液体完全流空后再加下一次

    3×3 mL缓冲液

    11

    合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上

    —

    12

    向柱内加入5mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞

    Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次

    收集目的细胞


  • 验证数据

    • 采用CD11b NanoBeads, human and mouse、S或L Separation Column及磁性分选器人外周血白细胞中富集或去除CD11b+细胞。随后使用anti-CD11b (clone: M1/70) Brilliant Violet 421™进行荧光染色，并圈选活细胞群进行分析。

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