一、表观遗传修饰如何调控基因功能？

表观遗传学是研究在不改变DNA序列的前提下，通过化学修饰调控基因活性的学科。这类修饰不涉及遗传密码本身的变化，却能稳定地影响基因的表达模式，并在细胞分裂中可能被继承。其作用对象广泛，涵盖DNA、RNA及组蛋白等多个层面。例如，组蛋白尾部可发生甲基化、乙酰化等多种共价修饰，这些修饰通过改变染色质的空间结构与电化学特性，决定基因转录的“开”或“关”。DNA甲基化正是其中一种核心的DNA层面修饰，因其在发育、疾病中的关键作用而成为研究焦点。区别于微小RNA等调控方式，DNA甲基化直接作用于基因组DNA，建立了一种相对稳定且可遗传的“分子标记”系统，深刻影响着细胞命运与机体健康。

二、DNA甲基化的主要形式与分布特点是什么？

在高等真核生物如人类中，最主要的DNA甲基化形式是胞嘧啶第五位碳原子的甲基化，生成5-甲基胞嘧啶。该修饰主要发生在基因组中胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸序列的胞嘧啶上。人类基因组中CpG位点分布不均，约60-80%的CpG位点处于甲基化状态，这些位点广泛分布于基因间区与重复序列，有助于维持基因组稳定性。而约有1%的基因组区域富含CpG序列，称为CpG岛，它们常与基因启动子区域重叠。在正常细胞中，大多数CpG岛处于非甲基化状态，以保持相关基因的转录潜能；当其发生异常高甲基化时，往往导致基因沉默。这种全局性低甲基化与局部（特别是启动子区）高甲基化并存的模式，是肿瘤等疾病中常见的甲基化景观特征。

三、DNA甲基化检测有哪些主流技术？

DNA甲基化的精准检测是研究的基础，其“金标准”方法是亚硫酸氢盐处理。该化学处理能将未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变，从而通过后续测序或杂交来区分甲基化状态。基于此原理，发展出两大类主流技术：甲基化芯片与甲基化测序。甲基化芯片（如850K芯片）具有通量高、成本相对较低、数据分析流程成熟等优势，适用于大样本筛查，其探针设计覆盖了CpG岛、启动子、增强子等多个功能区域。甲基化测序则能提供单碱基分辨率的全基因组信息，主要包括：全基因组甲基化测序（提供最全面的信息，但成本高）、简化代表性甲基化测序（通过酶切富集CpG富集区域，性价比高）以及基于免疫沉淀的甲基化DNA测序等。针对5-甲基胞嘧啶的氧化衍生物（如5-羟甲基胞嘧啶）的检测，则需要氧化亚硫酸氢盐测序等特殊技术。此外，对于特定基因或位点的验证，也可采用甲基化特异性PCR、焦磷酸测序等低通量方法。

四、DNA甲基化在生物学过程中有何关键作用？

DNA甲基化参与调控众多核心生物学过程，对胚胎发育、细胞分化、基因组印记和X染色体失活等至关重要。在发育过程中，甲基化谱式经历剧烈的动态重编程，以建立不同的细胞命运。在成体组织中，它维持细胞特异性基因表达程序的稳定。其生物学效应主要通过两种机制实现：一是直接阻止转录因子与DNA结合；二是招募具有甲基化结合结构域的蛋白，后者进而募集组蛋白修饰酶与染色质重塑复合物，共同形成抑制性的染色质环境。异常DNA甲基化与多种疾病密切相关。在肿瘤中，普遍存在全基因组低甲基化（可能导致基因组不稳定和癌基因激活）与抑癌基因启动子区高甲基化（导致其沉默）并存的现象。此外，神经精神性疾病、自身免疫病及代谢性疾病中也观察到特异的甲基化异常。

五、DNA甲基化研究有哪些重要应用前景？

DNA甲基化标志物在转化医学中展现出巨大潜力。在肿瘤领域，基于血液等体液中循环游离DNA的甲基化检测，可用于癌症的早期筛查、风险预测、分子分型与预后评估。例如，通过机器学习对脑肿瘤样本的甲基化谱进行分析，已能实现精准的分子分型，辅助临床诊断与治疗决策。在农业领域，植物DNA甲基化研究揭示了其在生长发育、环境胁迫响应及重要农艺性状（如产量、果实成熟）形成中的作用，为作物遗传改良提供了新靶点。此外，针对DNA甲基化修饰酶的药物研发（如DNA甲基转移酶抑制剂）已在骨髓增生异常综合征等血液肿瘤治疗中取得临床应用，展示了表观遗传靶向治疗的可行性。

六、提供甲基化的厂商有哪些？

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